期刊简介

               本学报是由南京军区联勤部卫生部主管,南京军区南京总院主办的以刊登医学研究生论文为特色的学术期刊,月刊。重点报道各高等医学院校、各医学研究所、各临床学院和附属医院研究生的课题研究成果和经验。设有专家论坛(以约稿为主)、论著、文献综述、经验荟萃、医院管理、护理等栏目。                

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  • 杂志名称:医学研究生学报杂志
  • 主管单位:南京军区联勤部卫生部
  • 主办单位:南京军区南京总医院
  • 国际刊号:1008-8199
  • 国内刊号:32-1574/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:第一、三届全军医学期刊优秀编辑奖期刊收录:万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 哥白尼索引(波兰), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
医学研究生学报杂志2018年第05期

2型猪链球菌stk/stp1基因敲除株的构建及特性研究

李超龙;张剑;吴倩倩;侯红芬;张会芳;王长军;曹祥荣;潘秀珍

关键词:2型猪链球菌, 基因敲除, 生物学特性, 丝/苏氨酸激酶和磷酸酶
摘要:目的 丝/苏氨酸激酶(STK)与丝/苏氨酸磷酸酶(STP)通过对蛋白质的可逆磷酸化调控原核生物的各项生理活动.文中旨在研究2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33中、stk/stp1同时缺失对其生物学特性及致病性的影响.方法 运用同源重组的方法构建2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33的stk/stp1基因敲除突变株 Δstk/stp1,比较分析野毒株05ZYH33与突变株 Δstk/stp1的生物学特性;通过细胞黏附实验、抗吞噬实验以及小鼠感染模型分析stk/stp1缺失对细菌毒力的影响.将30只SPF级BALB/c小鼠,用随机数字表法分成05ZYH33组(注射1 mL野毒株菌液)、Δstk/stp1组(注射1 mL突变株菌液)和THB组(注射1 mL的新鲜THB液体培养基),每组10只.结果 PCR结果显示,stk/stp1基因被壮观霉素抗性基因Spcr替换,突变株构建成功;生物学特性实验表明,05ZYH33和 Δstk/stp1在接种2 h后开始缓慢增殖,在7 h时都到达平台期.突变株进入对数生长期(A600≈0.4)的时间比野毒株推迟1 h左右,到达平台期后的菌体密度比野毒株低(0.8 vs 1.0).05ZYH33和 Δstk/stp1在血平板上均长出灰白色、圆形半透明、湿润、表面光滑的细小菌落.菌落周围有明显的 β-溶血环,菌落形态和溶血活性无明显变化.小鼠致病性实验显示,05ZYH33组小鼠在12 h内全部死亡,Δstk/stp1组小鼠在12 h内死亡9只,24 h内全部死亡,THB组无发病和死亡症状.结论 stk/stp1同时缺失可能主要影响细菌增殖、分裂相关蛋白的调控.