期刊简介

               本学报是由南京军区联勤部卫生部主管,南京军区南京总院主办的以刊登医学研究生论文为特色的学术期刊,月刊。重点报道各高等医学院校、各医学研究所、各临床学院和附属医院研究生的课题研究成果和经验。设有专家论坛(以约稿为主)、论著、文献综述、经验荟萃、医院管理、护理等栏目。                

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  • 杂志名称:医学研究生学报杂志
  • 主管单位:南京军区联勤部卫生部
  • 主办单位:南京军区南京总医院
  • 国际刊号:1008-8199
  • 国内刊号:32-1574/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:第一、三届全军医学期刊优秀编辑奖期刊收录:万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 哥白尼索引(波兰), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
医学研究生学报杂志2018年第11期

功能性受体钠离子牛磺胆酸共转运蛋白-Huh7细胞株的构建及其HBV易感性

朱甜甜;李毓雯;胡平平;李军;朱传龙

关键词:乙型肝炎病毒, 钠离子牛磺胆酸共转运蛋白, 易感性
摘要:目的 功能性受体钠离子牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)表达短暂,导致乙型肝炎病毒(HBV)感染肝癌细胞模型的效率低下且不稳定.文中旨在将GV358-NTCP转染Huh7细胞构建NTCP-Huh7细胞,并鉴定其是否具有HBV易感性.方法 使用GV358作为慢病毒载体,和NTCP编码基因连接后获得重组质粒GV358-NTCP,构建NTCP基因重组慢病毒,将GV358-NTCP转染Huh7细胞构建NTCP-Huh7细胞.采用HBV感染NTCP-Huh7细胞(NTCP-Huh7组)和Huh7细胞(Huh7组).将HBV分别与NTCP-Huh7组和Huh7组细胞共孵育18 h,换液后继续培养,并在第2、4、6、8、10、12天做相关检测.检测上清中HBsAg、HBeAg、HBcAg、HBV DNA以及细胞内HBV cccDNA含量,确定NTCP-Huh7重组细胞是否具有HBV易感性.结果 Western blot结果表明NTCP-Huh7细胞株可稳定表达NTCP蛋白.其孵育第8天,NTCP-Huh7组HBsAg、HBeAg(0.866±0.040、0.603±0.053)明显高于Huh7组(0.237±0.063、0.209±0.112),且在第8天达到高峰,第4、6、10天亦明显高于Huh7组(P<0.05).NTCP-Huh7组第4、6、8、10、12天上清中HBV DNA、HBV cccDNA明显高于Huh7组(P<0.05).免疫荧光法显示NTCP-Huh7细胞内检测到核心抗原,Huh7细胞内未检测到.结论 构建GV358-NTCP重组质粒转染Huh7后,获得的NTCP-Huh7细胞具有HBV易感性.