期刊简介
本学报是由南京军区联勤部卫生部主管，南京军区南京总院主办的以刊登医学研究生论文为特色的学术期刊，月刊。重点报道各高等医学院校、各医学研究所、各临床学院和附属医院研究生的课题研究成果和经验。设有专家论坛（以约稿为主）、论著、文献综述、经验荟萃、医院管理、护理等栏目。
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首页>医学研究生学报杂志
- 杂志名称：医学研究生学报杂志
- 主管单位：南京军区联勤部卫生部
- 主办单位：南京军区南京总医院
- 国际刊号：1008-8199
- 国内刊号：32-1574/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：第一、三届全军医学期刊优秀编辑奖期刊收录：万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 哥白尼索引(波兰), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
siRNA抑制MSK1表达对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响及其机制
黎华辉；方欣；郭向华；何志巍；李彬彬
关键词：鼻咽癌, 丝裂原和应激激活的蛋白激酶1, 组蛋白H3, C-Jun
摘要：目的 丝裂原和应激激活的蛋白激酶 1(MSK1)的异常活化在多种肿瘤的发生中起着重要作用.采用小干扰RNA(siRNA)抑制MSK1的表达,观察其对人鼻咽癌细胞CNE2增殖的影响,并探讨其可能机制. 方法 构建靶向MSK1的siRNA真核表达质粒,转染CNE2细胞并筛选获得稳定表达细胞株.将细胞分为空白对照组、阴性对照组、实验组.空白对照组:不转染质粒的CNE2细胞;阴性对照组:稳定转染阴性对照质粒的CNE2细胞(si-mock);实验组:稳定转染MSK1 siRNA质粒的CNE2细胞(si-MSK1).实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞中MSK1 mRNA和蛋白表达的改变;CCK-8和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的改变;流式细胞术检测细胞周期的改变;Western blot检测组蛋白H3Ser10磷酸化水平的改变;双萤光素酶报告系统和Western blot检测c-jun转录活性和蛋白表达的改变. 结果 与空白对照组相比,实验组在48、72和96h的细胞增殖抑制率明显增高(P<0.05);与阴性对照组相比,实验组细胞在24h后生长速度明显减慢,其48、72和96h的细胞增殖抑制率均明显增高(P<0.05).与空白对照组比较,实验组细胞的克隆形成能力明显降低(P<0.01);与阴性对照组相比,实验组细胞克隆形成能力的降低,其克隆形成数目明显减少[(221.00±20.08)个/300个细胞 vs (99.67±15.57)个/300个细胞,P<0.01].与阴性对照组相比,实验组细胞周期发生明显改变,G0/G1期细胞比例增加,而S期细胞比例明显减少(P<0.01).与空白对照组和阴性对照组相比,实验组能显著降低组蛋白H3Ser10磷酸化水平(P<0.01),而总组蛋白H3的表达则无明显改变.与空白对照组相比,实验组c-jun蛋白表达量和转录活性明显下降(P<0.05);与阴性对照组相比,实验组CNE2细胞c-jun转录活性明显降低[(100.00±0.00)% vs (48.77±10.71)%,P<0.05]. 结论 采用siRNA干扰MSK1表达可有效抑制人鼻咽癌细胞的生长、增殖,其机制可能与抑制组蛋白H3 Ser10磷酸化,进而下调c-jun转录活性有关.
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