期刊简介
本学报是由南京军区联勤部卫生部主管，南京军区南京总院主办的以刊登医学研究生论文为特色的学术期刊，月刊。重点报道各高等医学院校、各医学研究所、各临床学院和附属医院研究生的课题研究成果和经验。设有专家论坛（以约稿为主）、论著、文献综述、经验荟萃、医院管理、护理等栏目。
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首页>医学研究生学报杂志
- 杂志名称：医学研究生学报杂志
- 主管单位：南京军区联勤部卫生部
- 主办单位：南京军区南京总医院
- 国际刊号：1008-8199
- 国内刊号：32-1574/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：第一、三届全军医学期刊优秀编辑奖期刊收录：万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 哥白尼索引(波兰), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
人转录因子 PU ．1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定
刘晨阳；颜文杰；王敏；孙文逵；苏欣；施毅
关键词：PU.1, SPI1, 重组腺病毒, 烟曲霉, 天然免疫
摘要：目的： PU．1是调控肺泡巨噬细胞天然免疫功能的重要转录因子之一。文中旨在构建并鉴定表达人转录因子PU．1基因的重组腺病毒载体。方法将PU．1基因SPI1和真核表达载体pIRES-EGFP进行双酶切、连接酶连接，PCR扩增目的片段SPI1-IRES-EGFP，与中间质粒pDONR221和腺病毒骨架质粒pAd／CMV／V5-DEST进行重组，线性化后转染人胚肾293（HEK293）细胞，获得重组腺病毒pAD-SPI1-IRES-EGFP，经过大量扩增后获得高浓度的重组腺病毒。 TCID 50法测定重组腺病毒滴度，通过荧光显微镜和实时荧光定量PCR（ Real-time qPCR）鉴定PU．1基因在HEK293细胞中的表达。结果菌落PCR、酶切电泳及测序结果均表明重组腺病毒携带有正确的PU．1基因，TCID 50法计算腺病毒滴度为8×1011 IU／mL，荧光显微镜下可见明显的绿色荧光，Real-time qPCR转染重组腺病毒组 PU．1 mRNA表达量是转染空病毒组的2189．93倍。结论成功构建并获得了高浓度的人转录因子PU．1基因重组腺病毒，为后续研究高表达PU．1在宿主抗烟曲霉感染中的天然免疫作用奠定了基础。
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