期刊简介
本学报是由南京军区联勤部卫生部主管，南京军区南京总院主办的以刊登医学研究生论文为特色的学术期刊，月刊。重点报道各高等医学院校、各医学研究所、各临床学院和附属医院研究生的课题研究成果和经验。设有专家论坛（以约稿为主）、论著、文献综述、经验荟萃、医院管理、护理等栏目。
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首页>医学研究生学报杂志
- 杂志名称：医学研究生学报杂志
- 主管单位：南京军区联勤部卫生部
- 主办单位：南京军区南京总医院
- 国际刊号：1008-8199
- 国内刊号：32-1574/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：第一、三届全军医学期刊优秀编辑奖期刊收录：万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 哥白尼索引(波兰), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
MicroRNA Let-7b介导甲型流感突变型 PB1重组病毒的构建
谭鸣鸣；沈小玥；孙文逵；夏迪；施毅
关键词：H1N1流感, miRNA Let-7b, 基因重组, 反向遗传学
摘要：目的：疫苗是预防流感所致疾病的有效方法，MicroRNA介导的基因沉默机制为构建新型疫苗提供了新思路。文中旨在构建包含装载有 miRNA Let-7b 结合靶位 PB1基因的甲型流感重组病毒。方法比对 A／Nanjing／108／2009H1N1的PA、PB1、PB2与let-7b的靶序列选定PB1基因为优序列后，通过基因突变，插入Let-7b的结合靶位；构建pDP2000重组表达载体，设计pDP-mu-PB1，同时设计对照组pDP -sclb-PB1，并与其余7个质粒共转染MDCK细胞和293T细胞拯救病毒；留取上清接种鸡胚尿囊腔，血凝法检测病毒，TCID50检测病毒滴度；提取病毒RNA，采用RT-PCR扩增病毒cDNA，通过琼脂糖凝胶电泳和核苷酸序列分析鉴定病毒。结果选择PB1片段优序列（位置83 bp－107 bp），突变片段改变了3个氨基酸，同时有3个碱基不能与Let-7b靶序列配对；酶切鉴定重组质粒构建正确；重组病毒miRT（ miRNA target elements）-H1N1和scramble（scbl）-H1N1的血凝效价分别为1∶32和1∶64，病毒滴度为4．68×105 TCID50／mL和7．94×104 TCID50／mL；测序确认突变病毒包含目的片段。结论构建成功重组病毒株，为进一步的毒力评估实验奠定了基础。
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