期刊简介
本学报是由南京军区联勤部卫生部主管，南京军区南京总院主办的以刊登医学研究生论文为特色的学术期刊，月刊。重点报道各高等医学院校、各医学研究所、各临床学院和附属医院研究生的课题研究成果和经验。设有专家论坛（以约稿为主）、论著、文献综述、经验荟萃、医院管理、护理等栏目。
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首页>医学研究生学报杂志
- 杂志名称：医学研究生学报杂志
- 主管单位：南京军区联勤部卫生部
- 主办单位：南京军区南京总医院
- 国际刊号：1008-8199
- 国内刊号：32-1574/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：第一、三届全军医学期刊优秀编辑奖期刊收录：万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 哥白尼索引(波兰), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
人β-防御素4基因在HEK293细胞中的转染表达
曹玉红；成胜权；张光运；钱新宏；李如英；丁翠玲
关键词：人β-防御素4, 基因克隆, 真核表达载体, 基因转染
摘要：目的 人β-防御素4(human β-defensin 4,HBD 4)对多种病原菌有杀伤作用.HBD4的自然表达水平极低,体外获得难度较大且价格昂贵.利用基因工程技术生产重组的HBD4成为研究的焦点.文中旨在构建HBD4真核表达载体,探讨真核细胞表达HBD4的可行性.方法用PCR法从已构建的重组克隆载体pMD18-T/HBD4中扩增出HBD4全长编码基因,克隆入真核表达载体pEGFP-N2,构建pEGFP-N2/HBD4重组真核表达载体;通过脂质体转染法将pEGFP-N2/HBD4导入HEK293细胞,采用RT-PCR、荧光显微镜、Western blot检测HBD4的mRNA和蛋白表达情况,并对表达的HBD4进行抗菌活性的初步研究.结果构建的重组真核表达载体pEGFP-N2/HBD4,经酶切鉴定、测序,证实插入的序列与Genebank中的HBD4基因序列完全相同.将pEGFP-N2/HBD4转染HEK293细胞,在转染细胞检测到HBD4mRNA表达.荧光显微镜下可在细胞膜及细胞质中观察到绿色荧光.Western blot分析显示:在pEGFP-N2/HBD4 转染的HEK293细胞及细胞培养液中检测到了HBD4蛋白的表达.Kirby-Bauer纸片扩散法证实表达的HBD4蛋白对铜绿假单胞菌具有较强的杀伤作用.结论成功构建了HBD4基因的真核表达载体,并在HEK293细胞中表达出具有抗菌活性的HBD4多肽.
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