期刊简介
本学报是由南京军区联勤部卫生部主管，南京军区南京总院主办的以刊登医学研究生论文为特色的学术期刊，月刊。重点报道各高等医学院校、各医学研究所、各临床学院和附属医院研究生的课题研究成果和经验。设有专家论坛（以约稿为主）、论著、文献综述、经验荟萃、医院管理、护理等栏目。
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首页>医学研究生学报杂志
- 杂志名称：医学研究生学报杂志
- 主管单位：南京军区联勤部卫生部
- 主办单位：南京军区南京总医院
- 国际刊号：1008-8199
- 国内刊号：32-1574/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：第一、三届全军医学期刊优秀编辑奖期刊收录：万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 哥白尼索引(波兰), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
血管生成素样蛋白2真核表达载体的构建及在内皮细胞中的稳定表达研究
郑敬民；刘志红；黎磊石
关键词：血管生成素样蛋白2, 糖尿病肾病
摘要：目的:构建血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)真核表达载体和稳定过表达ANGPTL2的人脐静脉内皮细胞(HUVEC).方法:以PCR的方法从载体phrGFP-C中扩增人源化绿色荧光蛋白基因hrGFP 克隆到载体pIRES的B多克隆位点,构建成载体pIRES-hrGFP;利用合成的寡核苷酸在pIRES-hrGFP的骨架上引入一个便于载体线性化的多种限制性内切酶酶切位点,构建成载体pIRES-hrGFP-MS;以RT-PCR方法从人肾脏总RNA中扩增人ANGPTL2 cDNA,将其克隆到载体pIRES-hrGFP-MS的A多克隆位点,构建成ANGPTL2真核表达载体pIRES-hrGFP-MS-ANGPTL2.将线性化后的pIRES-hrGFP-MS-ANGPTL2以脂质体转染的方法导入HUVEC,利用药物筛选、绿色荧光观察以及ANGPTL2表达分析鉴定稳定过表达ANGPTL细胞株.结果:成功构建便于稳定转染的ANGPTL2真核表达载体pIRES-hrGFP-MS-ANGPTL2;得到了2个过表达ANGPTL2的HUVEC株GFP/ANGP1和GFP/ANGP2.光镜观察发现,ANGPTL2过表达细胞株GFP/ANGP1和GFP/ANGP2的形态由内皮细胞典型的铺路石状变为极度伸展的长梭形,提示ANGPTL2对内皮细胞可能有重要影响.结论:成功地构建了便于稳定转染的ANGPTL2真核表达载体;得到了稳定过表达ANGPTL2的内皮细胞株,为进一步揭示ANGPTL2的功能,探讨其在糖尿病肾病发生发展过程中的可能作用创造了条件.
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