期刊简介

               本学报是由南京军区联勤部卫生部主管,南京军区南京总院主办的以刊登医学研究生论文为特色的学术期刊,月刊。重点报道各高等医学院校、各医学研究所、各临床学院和附属医院研究生的课题研究成果和经验。设有专家论坛(以约稿为主)、论著、文献综述、经验荟萃、医院管理、护理等栏目。                

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  • 杂志名称:医学研究生学报杂志
  • 主管单位:南京军区联勤部卫生部
  • 主办单位:南京军区南京总医院
  • 国际刊号:1008-8199
  • 国内刊号:32-1574/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:第一、三届全军医学期刊优秀编辑奖期刊收录:万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 哥白尼索引(波兰), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
医学研究生学报杂志2007年第04期

天花粉蛋白突变体的构建及其在原核系统中的表达

安群星;穆士杰;张献清;陈蕤;吴原茹;夏爱军;雷迎峰;黎志东;徐志凯

关键词:天花粉蛋白, 人类免疫缺陷病毒, 定点突变, 原核表达, 纯化
摘要:目的:构建天花粉蛋白(TCS)突变体,并将其在原核系统内进行表达及纯化.方法:借助计算机预测TCS可能的抗原决定簇(YFF81-83)并设计出适当的突变引物.以栝楼基因组DNA为模板,利用重组PCR技术扩增TCS突变体全长基因,经BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切后与原核表达载体pRSET-A连接,转化感受态E.coliDH5α,提取质粒进行酶切鉴定及测序.将所获阳性重组质粒转化感受态E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,对表达产物进行Western blot鉴定.后用Ni-NTA亲和层析柱对所获突变体蛋白进行纯化.结果:成功构建了TCS突变体(TCSYFF81-83ACS),并获得了突变体蛋白在大肠杆菌内的可溶性高效表达,经Ni-NTA亲和层析柱纯化后,产生出大量均一的TCS突变体蛋白.结论:TCS的定点突变及其在原核系统内的表达,为基因工程方法改造TCS提供了新的途径.